Mô hình động vật ZFNs

Có thể đàm phánCập nhật vào03/04

Mô hình

Thiên nhiên của nhà sản xuất: Nhà sản xuất

Danh mục sản phẩm

Nơi xuất xứ

Tư vấn trực tuyến

Tổng quan

Mô hình động vật ZFN: Mô hình động vật ZFN (ZFN) là một mô hình động vật thí nghiệm được xây dựng bằng cách sử dụng kỹ thuật chỉnh sửa gen Kẽm Finger Nuclease. Kẽm finger nuclease được tạo ra từ sự hợp nhất của kẽm finger protein (ZFP) và nuclease (FokI), có khả năng liên kết cụ thể với trình tự DNA mục tiêu, trong khi nuclease chịu trách nhiệm cắt DNA, do đó giới thiệu sự phá vỡ sợi đôi tại các vị trí di truyền cụ thể, gây ra cơ chế sửa chữa của tế bào, cho phép loại bỏ, gõ hoặc đột biến gen.

Chi tiết sản phẩm

Một,Mô hình động vật ZFNsNguyên tắc công nghệ và cơ chế cốt lõi

ZFN làCông cụ chỉnh sửa gen lập trình thế hệ đầu tiênThông qua FusionTên miền liên kết DNA Động tác Balanced force technique (Miền cắt DNA(FokI nuclease) để đạt được mục tiêu chỉnh sửa:

Miền Finger-protein kẽm：

bởi30-34 đơn vị lặp lại axit aminThành phần, mỗi đơn vị thông quaB5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)Xác định một base cụ thể:

Loại RVD	Xác định base	Đặc trưng
NI	Một	cao
Ng	Từ T	cao
Hình ảnh HD	C	cao
NN	G / A	trung bình

Nhận dạng ngón tay kẽm đơn3 bp3-6 mục tiêu liên tiếp9-18 bpTrình tự.

Miền cắt FokI：

cầnNhị phânĐể kích hoạt chức năng cắt → ZFN cần được thiết kế theo cặp (cánh tay trái/cánh tay phải), vị trí cắt nằm giữa vị trí kết hợp của hai cánh tay (khoảng cách 5-7 bp).

Cơ chế biên tập：

Double-Chain Breaking (DSB) → Tế bào bắt đầu con đường sửa chữa:

Kết nối đầu cuối không đồng nhất (NHEJ)Chèn ngẫu nhiên/mất tích (Indels), dẫn đến loại bỏ gen.
Sửa chữa định hướng tương tự (HDR)Yêu cầu các mẫu sửa chữa ngoại sinh (như ssODN) để thực hiện đột biến điểm hoặc chèn gen.

Đột phá công nghệ: Shou thực hiện lầnBộ gen động vật có vú nhắm mục tiêu chỉnh sửa(2005), mở ra kỷ nguyên chỉnh sửa gen chính xác.

Hai,Mô hình động vật ZFNsTối ưu hóa quy trình và công nghệ

(I) Các bước hoạt động tiêu chuẩn

(II) Tối ưu hóa các thông số kỹ thuật chính

bước	Hoạt động cốt lõi	Tối ưu hóa sáng tạo
Thiết kế mục tiêu	Tránh các khu vực lặp lại/methyl hóa cao, khoảng 5-7 bp	Ứng dụng Chế phẩm sinh học Vườn Sinh Thái trong sản xuất Nấm (P.2) (
Kẽm ngón tay lắp ráp	Phương pháp Tandem Modular：

3-6 đơn vị ngón tay kẽm trong loạt
Golden Gate Clone (BsaI/BsmBI) | Xây dựng hoàn thành trong 6 ngày với tỷ lệ thành công>80 |
|Trình bày vectorTàu sân bay khởi động kép (CMV/T7), hỗ trợ tổng hợp mRNA và biểu hiện protein, phù hợp với nhiều loài (cá ngựa vằn, chuột, lợn).
|Phương thức giao hàngMicroinjection ZFNs mRNA được thụ tinh
Chuyển đổi tế bào soma+cấy ghép hạt nhân (động vật lớn) | Giảm phân phối mRNA
|Cải tiến sửa chữa| Mẫu kết hợp ssODN+Chất ức chế NHEJ (SCR7) | Hiệu quả HDR tăng gấp 3 lần |

B5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)

Mô hình các loài và bệnh điển hình

Loài	Mục tiêu gen	Mô hình bệnh	Hiệu quả/Kiểu hình	Giá trị nghiên cứu
Cá ngựa vằn	vàng	Bạch tạng	95% mất sắc tố F0	Sàng lọc chức năng gen phát triển
Chuột	Rag2 / IL2rg	Mô hình suy giảm miễn dịch	Loại bỏ hai gen, nền tảng cấy ghép nhân tạo	Nghiên cứu điều trị khối u miễn phí yi
lợn	GGTA1	Mô hình cấy ghép xenoguan	Loại bỏ kháng nguyên alpha-gal, giảm đào thải siêu cấp	Phát triển cơ quan nhân tạo
Ruồi giấm	màu vàng	Đột biến màu cơ thể	Tỷ lệ đột biến hệ sinh sản 5,7% (mô hình động vật)	Xác minh bảo vệ chức năng gen

b) Ứng dụng không thể thay thế

Chỉnh sửa khu vực GC cao：

Không giới hạn chuỗi PAM, nhắm mục tiêu các khu vực mà CRISPR/Cas9 không thể chỉnh sửa.

Yêu cầu giảm target：

Tỷ lệ lệch mục tiêu<0,1% (CRISPR là 1-10%) trong chỉnh sửa trị liệu.

Mô hình động vật lớn：

Các loài như lợn, bò có khả năng miễn dịch thấp hơn CRISPR.

Sản phẩm tương tự Khuyến nghị