Dịch vụ kỹ thuật ES Target

Có thể đàm phánCập nhật vào03/04

Mô hình

Thiên nhiên của nhà sản xuất: Nhà sản xuất

Danh mục sản phẩm

Nơi xuất xứ

Tư vấn trực tuyến

Tổng quan

Dịch vụ nhắm mục tiêu di truyền ES (Embryonic Stem Cell Targeting) là một kỹ thuật nhắm mục tiêu di truyền dựa trên tế bào gốc phôi (ES cell) được sử dụng chủ yếu để xây dựng các mô hình động vật loại bỏ gen hoặc loại bỏ gen. Thay đổi chính xác bộ gen đạt được bằng cách đưa DNA ngoại sinh vào các tế bào ES, sử dụng các nguyên tắc tái tổ hợp tương đồng để thay thế hoặc chèn các gen mục tiêu.

Chi tiết sản phẩm

Một,Dịch vụ kỹ thuật ES TargetĐịnh nghĩa kỹ thuật và nguyên tắc cốt lõi

Công nghệ nhắm mục tiêu ESLà một phương pháp chỉnh sửa gen dựa trên sự tái tổ hợp tương đồng của tế bào gốc phôi (ES), cho phép sửa đổi chính xác như loại bỏ gen (KO), loại bỏ điều kiện (CKO), loại bỏ gen (KI) và đột biến điểm (PM) bằng cách tích hợp các điểm DNA ngoại lai vào các vị trí cụ thể của bộ gen. Các nguyên tắc cốt lõi của nó bao gồm:

Cơ chế tái cấu trúc tương đồng：

Thiết kế bao gồmCánh tay tương tựMột vector (cùng nguồn gốc với gen đích) đưa một trình tự ngoại sinh, chẳng hạn như sàng lọc gen đánh dấu, vào vị trí mục tiêu thông qua tái tổ hợp đồng nguồn.

Hệ thống sàng lọc tích cực và tiêu cực：

Đang lọc thẻ(Ví dụ: Neoᵣ): Một vùng tương đồng được chèn vào để sàng lọc các tế bào ES tái tổ hợp thành công.
Thẻ lọc âm(Ví dụ: HSV-tk/DTA): Nằm ở bên ngoài cánh tay tương tự, loại bỏ các tế bào được chèn ngẫu nhiên.

Tế bào gốc phôi toàn năng：

Các tế bào ES biến đổi được tiêm vào phôi nang và phát triển thành chuột khảm (F0), thu được một mô hình di truyền ổn định thông qua việc truyền dòng sinh sản.

Định vị kỹ thuậtMục tiêu ES là tiêu chuẩn vàng trước CRISPR, đặc biệt phù hợp vớiBiên tập viên Big Fragment(10 kb) vàBiến đổi gen phức tạp(như gõ điều kiện).

Hai,Dịch vụ kỹ thuật ES TargetTiêu chuẩn hóa quy trình vận hành và đổi mới công nghệ

(1) Quy trình bắn bia ES truyền thống (7 - 12 tháng)

Phân tích các bước chính：

Xây dựng Carrier：

Chiều dài cánh tay tương đồng thường là 3-5 kb và cần có tàu sân bay BAC để chèn các mảnh lớn.

Lựa chọn dòng tế bào ES：

Dòng vật tư thông thường: 129S6/SvEvTac (hiệu quả tái cấu trúc cao), C57BL/6N (nền tinh khiết).

Chuẩn bị thể chế nhúng：

Tỷ lệ nhúng phôi nang sau khi tiêm khoảng 20-70%, cần được sàng lọc trực quan bằng các dấu hiệu màu lông như vật chủ bạch tạng.

Đổi mới công nghệ: Mục tiêu tế bào EPS

tế bào EPS(Extended Pluripotent Stem Cells) được báo cáo lần thứ hai bởi các nhà khoa học của Trung Quốc vào năm 2017, những lợi thế của nó bao gồm:

Nâng cao hiệu quả：

Mục tiêu hiệu quả như các tế bào ES truyền thống10-100 lần。

Chu kỳ rút ngắn：

Khảm hợp thể một bước đạt được, tiết kiệm được 3 tháng truyền giống.

Tăng cường toàn năng：

Một tế bào đơn được tiêm vào phôi nang để tạo ra 99,99% chimera.

Sản phẩm tương tự Khuyến nghị