RK-13 (dòng tế bào thận thỏ)

Xử lý tế bào:

1) Phục hồi tế bào đông lạnh:

Các ống lưu trữ đông lạnh chứa 1 mL đình chỉ tế bào được lắc nhanh chóng và tan băng trong một bồn tắm nước 37 ° C, thêm vào một ống ly tâm với 4-6 mL môi trường để trộn đều. Ly tâm 3-5 phút trong điều kiện 1000RPM, loại bỏ chất lỏng thượng lưu, tế bào treo lại trên môi trường. Đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào một chai (hoặc đĩa) có chứa 6-8ml môi trường để nuôi cấy 37oC qua đêm. Sự tăng trưởng tế bào và mật độ tế bào được quan sát dưới kính hiển vi vào ngày hôm sau.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 80% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện.

Đối với việc truyền tế bào dán tường có thể tham khảo các phương pháp sau:

1. Bỏ đi nuôi cấy, rửa sạch tế bào bằng PBS không chứa canxi, ion magiê 1 - 2 lần.

2. Thêm 0,25% (w/v) -0,53 mM EDTA vào chai nuôi cấy (chai T25 1-2mL, chai T75 2-3mL), đặt trong một hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa một cách thích hợp), sau đó quan sát sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu hầu hết các tế bào trở nên tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều khiển, sau vài lần nhấp vào chai nuôi cấy thêm 3-4ml môi trường chứa 10% FBS để chấm dứt tiêu hóa.

3. Nhẹ nhàng đánh đều rồi hút ra, ly tâm 3 - 5 phút trong điều kiện 1000 vòng M, bỏ đi chất lỏng, bổ sung 1 - 2 ml chất lỏng nuôi cấy rồi thổi đều. Đình chỉ tế bào được chia thành chai T25 mới theo tỷ lệ 1: 2, thêm 6-8ml môi trường mới được cấu hình theo yêu cầu của hướng dẫn để duy trì sự phát triển của tế bào, truyền thừa tiếp theo được thực hiện theo tỷ lệ 1: 2~1: 5 theo tình hình thực tế.

3) Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.

RK-13 (dòng tế bào thận thỏ)

Tài sản hàng hóa

Giới thiệu sản phẩm

Tuổi (Giới tính) 5 tuần tuổi

Nguồn tổ chức Thận

Đặc tính tăng trưởng tế bào dán tường

Hình thái tế bào Giống tế bào biểu mô

Lớp an toàn sinh học 2

Môi trường tăng trưởng MEM + 10% FBS + 1% P / S

Tỷ lệ thế hệ được đề xuất 1:2-1:4

Tần số thay đổi chất lỏng được đề nghị 2~3 lần/tuần

Điều kiện lưu trữ đông lạnh

Dung dịch đông lạnh:55% nền tảng+40% FBS+5% DMSO

Nhiệt độ: Nitơ lỏng

Điều kiện nuôi dưỡng

Pha khí: Không khí,95%； CO2, 5%

Nhiệt độ:37℃

Các bước thao tác nuôi cấy di truyền:

(1) Khi hình thái tế bào và mật độ tăng trưởng dưới kính hiển vi đạt 90%, việc truyền gen được thực hiện.

b) Hút dịch bồi dưỡng. Thêm PBS rửa 1-2 lần, lắc đều rồi vứt đi.

(3) Bao gồm đáy chai và chứa EDTA.

(4) Chai nuôi cấy được đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ để tiêu hóa, khoảng 3 phút để lấy ra, sử dụng kính hiển vi để quan sát lượng tế bào vượt quá 80%, sự co lại xảy ra để tròn, khoảng cách tế bào trở nên lớn hơn. Nhẹ nhàng vỗ chai nuôi cấy để loại bỏ các tế bào còn lại, thêm 2 lần lượng ngừng tiêu hóa và thổi đều để tránh tiêu hóa quá mức.

(5) Đình chỉ tế bào được hút vào ống ly tâm, ly tâm 1000 vòng/phút 3~5 phút.

(6) Hút sạch, thêm vào tế bào treo lại nuôi cấy, thổi tế bào để phân tán đều.

(7) Hút huyền dịch tế bào bị loại bỏ, chọn mật độ thích hợp để tiêm vào chai nuôi cấy mới, bổ sung dịch nuôi cấy và lắc đều, đặt hộp nuôi cấy CO2 37 ℃ để nuôi cấy.

(8) Xác định thời gian thay dịch hoặc chuyển thế dựa trên trạng thái tăng trưởng của tế bào.

(9) Tế bào đông lạnh

Xử lý tế bào sau khi tiếp nhận:

1) Sau khi nhận được tế bào, 75% rượu khử trùng tường chai đặt chai T25 trong 37 ℃ nuôi cấy hộp đặt khoảng 2-3 giờ, nếu bạn tìm thấy chai bị hỏng, tràn chất lỏng và ô nhiễm tế bào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi kịp thời sau khi chụp ảnh.

2) Vui lòng xác nhận trạng thái tế bào dưới kính hiển vi 4 hoặc 5X, trong khi chụp ảnh các tế bào vừa nhận được (10 × 20 × mỗi 2-3 và hình ảnh bên ngoài của chai nuôi cấy được lưu giữ, làm cơ sở cho trạng thái tế bào khi nhận được sau khi bán.

3) tế bào dán tường: các tế bào được đặt trong một buồng nuôi cấy 37 ℃ trong 2-3h, dưới kính hiển vi để xem sự phát triển của tế bào và tình trạng dán tường, một số tế bào dán tường trong quá trình vận chuyển nhanh sẽ rơi ra và rơi ra do rung động sau khi hình thành các cụm. Nếu mật độ tăng trưởng của tế bào dưới 60%, có thể loại bỏ môi trường truyền dịch trong chai nuôi cấy (nếu có tế bào không dán tường cần thu hồi ly tâm, treo lại vào chai nuôi cấy ban đầu), thêm môi trường mới được xây dựng 6-8mL, đặt vào trong hộp nuôi cấy tế bào để tiếp tục nuôi cấy. Nếu mật độ tăng trưởng tế bào đạt trên 70% -80%, có thể tiến hành xử lý di truyền tế bào. Trong quá trình truyền thừa, nếu các tế bào bị tách ra do rung động vận chuyển cần được thu hồi ly tâm.

Sản phẩm công ty đang bán:

Yếu tố ba thùy chuộtTên tiếng Anh: TFF2 ELISA Kit

Mouse signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit Chuột truyền tín hiệu phân tử 7 (Smad7) Kit thử nghiệm

Ratcarbonicanhydrase, CAELISAKit Thử nghiệm Enzyme Chuột (CA) Kit 96T/48T Nhập khẩu

CLIAKitforHAase (HumanHyaluronidase) ELISAKit Người Hyaluronidase

Cystepsin tế bào-8 (CASPASE-8) Bộ xét nghiệm định lượng đo màu hoạt động 20 lần

RatVascuolarcelladhesionmolecule1, VCAM-1ELISAKit Chuột Mạch Nội Mô Tế Bào Dính Phân Tử 1 (VCAM-1/CD106) Detection Kit Thông số kỹ thuật: 96T/48T

Chuột tái tổ hợp FZD10 Frizzled-10/FZD10 Protein (nhãn Fc) (nhãn Fc) Protein

Angiotensin II receptor (Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor) thụ thể angiotensin II

TEK tái tổ hợp Tie2/CD202b/TEK Protein (nhãn His&GST) Protein

CSNK1G2 Protein Human tái tổ hợp protein CSNK1G2

IL20RB Protein Rat Chuột tái tổ hợp IL20RB Protein (thẻ Fc)

Chất ức chế CystepsinProtein tái tổ hợp Recombinant Cystatin 3 (CST3)

CSNK1G2 Protein Human tái tổ hợp protein CSNK1G2

Chuột tái tổ hợp CST6 Cystatin E/CST6 Protein Protein

KLRC1 Protein Cynomolgus Khỉ ăn cua tái tổ hợp NKG2A/NKG2/CD159A/KLRC1 Protein (nhãn Fc)

CSNK2A2 Protein tái tổ hợp CSNK2A2/CK2A2 Protein

RK-13 (Dòng tế bào thận thỏ)Chuột Anti-Complex(TAT) Bộ dụng cụ ELISA 96T/48T

Rat parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit Chuột Thử nghiệm Hormone tuyến cận giáp (PTH) Kit

HumanGlucoseanspoer1, GL1ELISAKit Bộ xét nghiệm vận chuyển glucose người 1 (GL1) 96T/48T Nhập khẩu

Human2,3-Disphosphoglycerate, Bộ xét nghiệm 2,3-DPG Con người 2,3-Disphosphoglycerate (2,3-DPG) Bộ xét nghiệm Thông số kỹ thuật: 96T/48T

Nấm/Bộ tách RNA tổng số tế bào men 20 lần

MouseapoproteinB100, apo-B100ELISAKit Chuột Apolipoprotein B100 (apo-B100) Kit Thông số kỹ thuật: 96T/48T

Chuột hòa tanThông số kỹ thuật sản phẩm: - Type: Digital Multifunction Imaging System - Standard Functions: Copy, Print (

ChuộtB5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Chuột Prolactin(mouse PRL) Tác dụng: Thông số kỹ thuật ELISA: Nhập khẩu

chuột mang thaiThông số kỹ thuật sản phẩm: - Type: Digital Multifunction Imaging System - Standard Functions: Copy, Print (