Tế bào biểu mô sclera ở chuột

Báo cáo thí nghiệm:

Một, tách ra và bồi dưỡng:

Trong điều kiện vô trùng, mô tâm nhĩ chuột SD 1-3d tuổi được lấy ra, sau đó khối mô này được làm sạch 2 lần bằng PBS, mô được cắt thành kích thước khoảng 1 mm 3;

2, thêm 4 mL chất lỏng tiêu hóa enzyme (0,1% và 0,1% collagen loại I) vào khối mô, treo 10 giây, tiêu hóa 10 phút trong điều kiện 37 ℃, sau đó thổi bằng ống nhỏ giọt để làm đình chỉ tế bào đơn, kết tủa tự nhiên và thu thập thanh lọc, với môi trường FBS 10% để chấm dứt tiêu hóa sau khi đặt 4 ℃;

3, các mô còn lại được thêm vào 3~4mL enzyme tiêu hóa dịch, treo trong 10 giây, sau khi đặt 37 ℃ tiêu hóa trong 10 phút, theo các phương pháp trên thu thập thanh lọc và chấm dứt tiêu hóa sau khi đặt 4 ℃, lặp lại bước này 2-3 lần, cho đến khi mô được tiêu hóa;

4, lọc chất lỏng tiêu hóa tế bào bằng lưới thép không gỉ 200 lưới, ly tâm 1200r/phút 10 phút, loại bỏ và làm sạch, các tế bào kết tủa được sử dụng với 10% FBS DMEM/F12 phương tiện truyền thông đình chỉ, tiêm trong 25cm2 chai, đặt ở 37 ℃, 5% CO2 nuôi cấy;

5. Sau khi dán tường vi sai 1h, hút môi trường nuôi cấy, theo yêu cầu thí nghiệm để tiêm vào tấm 6 lỗ để tiếp tục nuôi cấy;Giám định huỳnh quang miễn dịch:

Khi tế bào cơ nhĩ phát triển đến 80% dung hợp, loại bỏ môi trường, rửa sạch tế bào bằng PBS ấm 2 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó cố định tế bào bằng 4% paraformaldehyde ở nhiệt độ phòng trong 15 phút;

2, PBS rửa tế bào 2 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó ở 4 ℃, với 0,1% Triton X-100 xuyên qua màng 15 phút;

PBS xả tế bào 2 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó ở nhiệt độ phòng, đóng tế bào với 4% BSA trong 30 phút;

Pha loãng alpha-actin theo tỷ lệ 1: 100, sau đó đặt nó trong tủ lạnh 4 ° C để ủ tế bào qua đêm;

5, PBS tuôn ra các tế bào 3 lần, mỗi lần 10 phút, pha loãng kháng thuốc kháng alpha-actin theo tỷ lệ 1: 150, đặt ở 37 ℃ trong 1 giờ;

Rửa bằng PBS 3 lần, mỗi lần 10 phút, xem hình ảnh dưới kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược và chụp ảnh.

Giới thiệu tế bào:

Màng cứng là lớp bên ngoài của thành nhãn cầu, được tạo thành từ collagen dày đặc và các sợi đàn hồi, có cấu trúc cứng và đục. Củng mạc tiền duyên nối với giác mạc, phía sau kéo dài với vỏ cứng của thần kinh thị giác.

Củng mạc được chia từ ngoài vào trong: Củng mạc thượng tầng; Tầng chính; Lớp dưới của màng cứng. Trong đó tầng trên là do tế bào biểu mô cấu thành.

Đặc tính tế bào:

1） Mô có nguồn gốc từ mô mắt bình thường của động vật thí nghiệm.

2)Nhận dạng tế bào: Keratin phổ rộng(PCK)Màu huỳnh quang dương tính.

3)Xác định độ tinh khiết của tế bào cao hơn90%。

4)Không chứaHIV-1、Vật HBV、HCVChi nguyên thể, men và.

5)Cách tế bào phát triển: biểu mô, tế bào bất thường, nuôi cấy trên tường.

Đề cử cơ sở bồi dưỡng:

Chúng tôi khuyên bạn nên sử dụngThành phố DelfThế hệ gốc Biểu bì Hệ thống nuôi cấy tế bào Là môi trường nuôi cấy trong ống nghiệm.

Chú ý:

1. Sau khi nhận được tế bào, trước hết quan sát xem bình tế bào có còn nguyên vẹn hay không, dịch nuôi cấy có rò rỉ, đục ngầu hay không, nếu có hiện tượng trên xảy ra xin liên hệ với chúng tôi kịp thời.

2. Đọc kỹ hướng dẫn sử dụng tế bào để hiểu thông tin liên quan đến tế bào, chẳng hạn như hình thái tế bào, môi trường được sử dụng, tỷ lệ huyết thanh, cytokine cần thiết, v.v., đảm bảo rằng các điều kiện nuôi cấy tế bào phù hợp, nếu các vấn đề xảy ra với tế bào do điều kiện nuôi cấy không phù hợp, trách nhiệm là trách nhiệm của khách hàng.

3. Lau bề mặt chai tế bào bằng rượu 75%, quan sát trạng thái tế bào dưới kính hiển vi. Do vấn đề vận chuyển, một số tế bào bị vỡ do thay đổi nhiệt độ và va chạm mạnh mẽ, là hiện tượng bình thường. Sau khi quan sát tình trạng tế bào tốt, 75% chai khử trùng rượu tường đặt chai T25 trong một môi trường 37 ℃ trong 4-6 giờ.

4. Các tế bào dán tường có thể được tiêu hóa, các tế bào lơ lửng được trộn trực tiếp để thu thập các tế bào, 900 rpm-1000 rpm ly tâm trong 3 phút, loại bỏ. Thêm 5 mL PBS tái đình chỉ tế bào và 900 rpm-1000 rpm ly tâm trong 3 phút, tái đình chỉ tế bào với môi trường tươi * và tiêm vào một chai hoặc đĩa petri mới để nuôi cấy.

5. Yêu cầu khách hàng sử dụng môi trường có cùng điều kiện để nuôi cấy tế bào.

6. Đề nghị khách hàng chụp vài tấm ảnh tế bào trong 3 ngày đầu sau khi nhận được tế bào, ghi lại trạng thái tế bào, dễ dàng giao tiếp với bộ phận kỹ thuật của chúng tôi. Do nguyên nhân vận chuyển, các tế bào nhạy cảm cá nhân sẽ xuất hiện tình trạng không ổn định, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi kịp thời, thông báo cho chúng tôi biết tình hình cụ thể của tế bào, để nhân viên kỹ thuật của chúng tôi theo dõi chuyến thăm lại cho đến khi vấn đề được giải quyết.

7. Tế bào này chỉ được sử dụng trong nghiên cứu khoa học.

Lưu ý: Môi trường vận chuyển (môi trường truyền dịch) không còn có thể được sử dụng để nuôi cấy tế bào, hãy thay thế bằng môi trường * mới được điều chế theo các điều kiện nuôi cấy tế bào hướng dẫn để nuôi cấy tế bào. Nhận được đề xuất di truyền sau tế bào 1: 2.

Lưu ý: 1:2 là 1 chai T25, 2 chai T25 hoặc 2 đĩa 6cm. Không phải 1 chai T25 chuyền 2 đĩa 10cm.

Sản phẩm công ty đang bán:

Protein liên kết axit béo ruột chuột(iFABP) ElisaBộ phát hiện

Chủ đề thuốc thử phân tích acetyl

Chuột trắng Intermedicin4 (IL-4) ElisaBộ xét nghiệm phân tích

mạc đường ruột muqueuses digestives (MDHAR) Hộp kiểm tra

tế bàoCYP2B1Bộ xét nghiệm định lượng huỳnh quang biểu hiện protein

Bộ xét nghiệm màu đỏ trung tính cho chức năng lysosome tinh khiết

大鼠整合素α6 (ITG)α6)ElisaBộ phát hiện

thuốc nhét hậu môn suppositoires (Bệnh nhân Salmonella Typhi) Bộ xét nghiệm gen định tính

Thuốc ức chế beta lactamase ở chuột(BLI) ElisaTest Kit miễn phí

BTB / POZProtein miền19Kháng thểBttbd19

Cd43Kháng thể đơn dòngCd43

Các thụ thể peptide natriCKháng thể đơn dòngThụ thể peptide natriuretic C

Phốt phát hóaKhói tật 1Kháng thểPhospho-Dab1 (Ser491)

γ-Phân bón glutamyl transpeptidase2Kháng thể chuỗi nặngGGT2 chuỗi nặng

Trung bình trắng1Chấp nhận1Kháng thểIL-1R1

Tế bào sắc tốP450 2C18Kháng thểCYP2C18

Chất ức chế kinase phụ thuộc cyclin2CKháng thểCDKN2C / p18 INK4c

LLoại Canxi ChannelA1Phân loại6Kháng thểCACH6 / Cav2.3

MSI2Kháng thể ProteinMSI2

Kháng thể đơn dòngFibrinogen của con người

Protein gia đình chất mang dung môi38Thành viênSố A8Kháng thểSản phẩm SLC38A9

Protein neo đặc hiệu cho tinh hoàn1Kháng thểSản phẩm ANKMY1

Protein hình thái xương9Kháng thểBMP9

Yếu tố trưởng thành lipase1Kháng thểLMF1

Cyclin phụ thuộc kinase8Kháng thểCDK8

Chu kỳ tế bào nấm menMãphương trình (Sự đồng bộ) Xử lý bộ dụng cụ

Điện thoán1614Kháng thể Protein

Điện thoán1614

ATP5EKháng thể Protein

Tế bào biểu mô sclera ở chuộtATP5E