Hoạt động của lactate dehydrogenase (phương pháp WST-8)

Hạt chia organic (LDH) Nguyên tắc xác định vi lượng hoạt động‌ Bằng cách phát hiệnLDHxúc tác quá trình giảm pyruvate thành axit lacticNADHlượng sản xuất để xác định gián tiếp.LDHHoạt tính.

Quy trình cụ thể như sau:

Nguyên lý phản ứng:ởLDHDưới tác dụng của nó,NAD+Tạo bởi reductionNADH。NADHvàSản phẩm WST-8Tương tác tạo ra màu sắc, do đó đo màu (λ)tối đa = 450 nm）‌。

Điều kiện phản ứng:LDHđặtNADGiảm xuốngNADH，NADHvàSản phẩm WST-8Sự tương tác tạo ra màu sắc. Phản ứng này được thực hiện trên băng tránh ánh sáng, các thành phần (ví dụ:Bộ đệm thử nghiệm、Lactate、NAD、Sản phẩm WST-8、Nâng caoNó cần được lấy ra khỏi tủ lạnh và cân bằng đến nhiệt độ phòng trước khi thử nghiệm, và toàn bộ quá trình cần được thực hiện tránh ánh sáng.

‌ Đo hấp thụ:ở450 nmĐo độ hấp thụ ở bước sóng, độ hấp thụ vàLDHHoạt động tỷ lệ thuận, có thể được xác định bằng phép đo màuLDHHoạt động ‌

Các bước thử nghiệm và thiết bị cần thiết:

Các bước thử nghiệm:thuốc nhét hậu môn suppositoires (1×Bộ đệm thử nghiệm、NAD、Sản phẩm WST-8、Nâng caovàLactatetrộn đều), thêm chất lỏng làm việc96Trong tấm lỗ hoặc đĩa so sánh thủy tinh vi lượng, thêm mẫu cần đo,37℃ Độ hấp thụ được đo sau khi ủ nhiệt độ không đổi trong một thời gian nhất định.

Thiết bị cần thiết:Thiết bị vớt váng dầu mỡ cho xử lý nước thải -PetroXtractor - Well Oil Skimmer (450 nmĐộ hấp thụ ánh sáng), hộp nhiệt độ ổn định, máy làm đá, máy ly tâm nhiệt độ thấp,96Tấm lỗ hoặc đĩa đo thủy tinh vi lượng, súng pipet và đầu súng có thể điều chỉnh, nước khử ion, máy san lấp mặt bằng (nếu là mẫu mô).

Cân nhắc thử nghiệm‌：

Bảo quản thuốc thử:Các thành phần (nhưBộ đệm thử nghiệm、Lactate、NAD、Sản phẩm WST-8、Nâng caoCần bảo quản tránh ánh sáng trên băng, tránh đóng băng và tan chảy nhiều lần.

Chú ý hoạt động:Toàn bộ quá trình thí nghiệm phải được thực hiện trên băng để tránh ánh sáng làm ảnh hưởng đến kết quả.‌。