Môi trường đặc biệt cho nguyên bào sợi phôi chuột 3T3-L1

Giới thiệu sản phẩm:

Môi trường nuôi cấy tế bào 3T3-L1 được tối ưu hóa cẩn thận bởi đội ngũ kỹ thuật, sau khi thử nghiệm lâu dài, sản phẩm này có thể duy trì trạng thái tăng trưởng tốt của tế bào 3T3-L1. Sản phẩm này đã chứa các thành phần khác nhau cần thiết cho sự phát triển của tế bào 3T3-L1 mà không cần thêm bất kỳ thành phần nào và có thể được sử dụng trực tiếp trong nuôi cấy in vitro của tế bào 3T3-L1. Sản phẩm này chỉ nhằm mục đích nghiên cứu thêm và không được sử dụng trong chẩn đoán, điều trị, lâm sàng, gia đình và các mục đích khác.

Các bước cụ thể trong nuôi cấy tế bào:

I. Thiết bị thông thường

1. Thiết bị phòng chuẩn bị

Máy chưng cất nước cất đơn, máy chưng cất nước cất đôi, xi lanh axit, lò nướng, nồi áp suất cao, tủ lưu trữ (đặt các mặt hàng chưa khử trùng), tủ lưu trữ (đặt các mặt hàng đã khử trùng), bàn đóng gói. Thiết bị phòng phân phối: cán cân xoắn và cán cân điện tử (cân thuốc),phĐo lường chất lỏng nuôi cấyphB5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

2. Thiết bị cho phòng nuôi cấy

Thiết bị vớt váng dầu mỡ cho xử lý nước thải -PetroXtractor - Well Oil Skimmer (-80℃), điều hòa, bình CO2, bàn cạnh (ghi chép thí nghiệm).

3. Thiết bị phải được đặt trong phòng vô trùng

Máy ly tâm (thu thập tế bào), bàn làm việc siêu sạch, kính hiển vi đảo ngược,CO2Hộp ấp trứng (nuôi cấy ấp trứng), nồi nước, máy khử trùng oxy,4℃Tủ lạnh (đặthuyết thanhthuốc nhét hậu môn suppositoires (

II. Hoạt động vô trùng

(I) Khử trùng phòng vô trùng

1.Làm sạch phòng vô trùng thường xuyên: mỗi tuần một lần, lau sàn bằng nước máy, lau bàn, bàn siêu sạch, v.v., sau đó sử dụng3‰Đến Sul or New Jill.0.5Lau sạch axit axetic.

2.CO2Khử trùng lồng ấp: sử dụng đầu tiên3‰Rửa sạch và sau đó sử dụng75% cồn hoặc0.5% axit axetic quá oxy, lại dùng đèn cực tím chiếu xạ.

3.Khử trùng trước khi thử nghiệm: bật đèn UV, máy khử trùng trioxygen, hệ thống lọc không khí mỗi20-30phút.

4.Khử trùng sau thí nghiệm: với75Hàm lượng cồn (3‰(Tân Khiết Nhĩ Diệt) Lau sạch bàn siêu sạch, bàn biên, bàn hiển vi đảo ngược.

Phương pháp nuôi cấy tế bào:

01 Các bước hoạt động vun đắp nguyên đại

Các bước thao tác đào tạo nguyên đại là: lấy nguyên liệu→tách biệt→Trồng trọt.

（1) Lấy nguyên liệu: Đối với các tổ chức khác nhau có các phương pháp lấy nguyên liệu khác nhau, nhưng tất cả đều phải giữ nguyên vật liệu tươi và vô trùng nghiêm ngặt.

Các bước hoạt động của nuôi cấy di truyền tế bào như sau:

（1) Hình thái tế bào và mật độ tăng trưởng được quan sát dưới kính hiển vi đảo ngược trước khi chuyển giao, khi mật độ tăng trưởng tế bào đạt được80%~90%Khi đó, có thể tiến hành truyền đời.

（2) Hút hoặc đổ dịch nuôi cấy trong bình nuôi cấy. tham giaPBSrửa sạch1~2Lần sau, trái phải nhẹ nhàng lay động rồi vứt bỏ.

（3) Thêm lượng vừa phải vào bình theo kích thước bình nuôi cấy.EDTAThông thường nên đậy kín toàn bộ đáy bình bồi dưỡng.

（4(Đặt bình nuôi cấy vào)37 ℃ CO2Hộp nuôi cấy tiến hành tiêu hóa,2 ~ 5 phútSau đó lấy ra đặt dưới kính hiển vi đảo ngược để quan sát, khi phát hiện có70%~80%Khi các tế bào co lại tròn và khoảng cách tế bào lớn hơn, sau đó vỗ nhẹ vào chai để các tế bào còn lại rơi ra và thêm vào ngay lập tức2Lượng dịch nuôi cấy gấp đôi ngừng tiêu hóa, sử dụng đầu hút nhẹ nhàng thổi, trộn đều, phòng ngừa tiêu hóa quá mức.

（5) Hút tất cả các dịch đình chỉ tế bào vào ống ly tâm,1000rpm / phútLy tâm3 ~ 5 phút。

（6) Bỏ sạch, thêm vào một lượng lớn dịch bồi dưỡng, nhẹ nhàng thổi trộn đều, làm cho tế bào phân tán đều.

（7) Sử dụng đầu hút để hấp thụ một lượng vừa phải đình chỉ tế bào, tiêm với mật độ thích hợp trong chai nuôi cấy mới, bổ sung chất lỏng nuôi cấy, lắc, đặt trong37 ℃ CO2Bồi dưỡng trong hộp bồi dưỡng.

（8) Căn cứ vào trạng thái tăng trưởng của tế bào để xác định thời gian thay dịch hoặc truyền dịch, thậm chí tiến hành đông lạnh tế bào.

Chú ý:

（1Hoạt động vô trùng được thực hiện nghiêm ngặt, tất cả các thuốc thử và vật liệu tiêu thụ phải được vô trùng và phải được chiếu xạ bằng tia cực tím trong công việc siêu sạch vô trùng30 phútTrên đây, để tránh ô nhiễm tế bào.

（2) Chất nuôi cấy được sử dụng phải phù hợp với sự tồn tại và phát triển của tế bào. Tế bào có nguồn gốc từ các loại động vật, loại mô khác nhau, yêu cầu đối với dịch nuôi cấy không giống nhau, khi cần thiết có thể dùng phương pháp tiền thí nghiệm để lựa chọn dịch nuôi cấy thích hợp.

（3Huyết thanh bò thai đóng một vai trò quan trọng trong việc duy trì sự sống còn của tế bào và thúc đẩy sự phát triển của tế bào. Huyết thanh bò thai thích hợp có thể được chọn dựa trên tài liệu hoặc thử nghiệm trước. Một khi đã xác định, nó nên được duy trì cho đến khi thí nghiệm hoàn thành.

（4Khi tiêu hóa tế bào nên tránh thời gian tiêu hóa quá ngắn dẫn đến tiêu hóa không, số lượng tế bào thu thập được ít, hoặc thời gian tiêu hóa quá dài dẫn đến các tế bào tự do thành các khối, khi các tế bào đã bị tổn thương hoặc chết, ảnh hưởng đến số lượng tế bào và tiến độ thí nghiệm.

（5Khi tế bào ly tâm nên tránh lực ly tâm quá nhỏ, số lượng tế bào thu thập không đủ, hoặc lực ly tâm quá lớn gây tổn thương tế bào. Sau khi lắng đọng tế bào sau khi ly tâm được loại bỏ, trước tiên cần loại bỏ lắng đọng tế bào, sau đó thêm vào dịch nuôi cấy để treo lại, như vậy tổn thương tế bào nhỏ hơn so với thổi trực tiếp, có thể cải thiện tỷ lệ sống của tế bào.

（6Khi thổi tế bào nên cố gắng tránh sản xuất tế bào để tránh làm tổn thương tế bào và ảnh hưởng đến trạng thái tế bào (phần còn lại của chất lỏng trong quá trình thổi có thể làm giảm sản xuất bong bóng khí).

Sản phẩm công ty đang bán: