293 HEK-293 (tế bào thận phôi người)

293 HEK-293 (tế bào thận phôi người)

Tên khácHà Nội 293; HEK-293； Số 293; Hà Nội: 293; 293; 293 ha đất; Thận người 293

Phương án nuôi cấy A (mặc định)

Môi trường phát triển:

MEM (ATCC cải tiến)+10% FBS+1% P/S

Điều kiện bồi dưỡng:

Giai đoạn khí: Không khí, 95%; CO2， 5%, nhiệt độ: 37 ℃

Lưu ýTế bào này dán tường lỏng lẻo, khi thao tác xin cố gắng nhẹ nhàng; Khi thay dịch cần chuẩn bị môi trường nuôi cấy; Nếu nhận hàng có khối tế bào lớn tróc ra, là hiện tượng bình thường, xin xử lý theo các điều cần lưu ý khi nhận hàng.

Tài liệu tham khảo (nguồn)

Mô tả nền là các tế bào bất tử được hình thành bởi các tế bào thận phôi người được chuyển đổi bởi adenovirus 5 (Ad5) được cắt, chứa và thể hiện gen Ad5 được chuyển đổi. Các báo cáo ban đầu chỉ ra rằng bộ gen chứa DNA ở đầu bên trái và bên phải của bộ gen Adenovirus 5 (Ad5), nhưng bây giờ rõ ràng chỉ có DNA ở đầu bên trái của nó. Sau khi giải trình tự nhân bản các điểm chèn của Ad5, các nucleotide tuyến tính 1-4344 bit của Ad5 được tích hợp vào nhiễm sắc thể 19 (19q13.2). Vật chủ được khuếch đại bởi các vectơ adenovirus ở người, các thụ thể bề mặt tế bào có thể biểu hiện các protein bolenin bất thường, bao gồm các tiểu đơn vị integrin beta 1 và tiểu đơn vị alpha-v của thụ thể bolenin.

Tuổi (Giới tính)Thai nhi

Nguồn tổ chứcthận; Biến đổi adenovirus 5DNA

Loại tế bàoDòng tế bào biến đổi

Lớp an toàn sinh họcSản phẩm BSL-2

Thời gian nhân~ 24-30 giờ

Gây khối uCó, hình thành khối u ở chuột khỏa thân.

Biểu hiện receptorvitronectin

Cơ chế bảo quảnATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602

Xử lý tế bào:

1) Sự hồi sinh của các tế bào đông lạnh: Các ống chứa 1 mL đình chỉ tế bào được lắc nhanh chóng và tan băng trong bồn nước 37 ℃, thêm vào các ống ly tâm với môi trường 4-6 mL để trộn đều. Ly tâm 3-5 phút trong điều kiện 1000RPM, loại bỏ chất lỏng thượng lưu, tế bào treo lại trên môi trường. Đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào một chai (hoặc đĩa) có chứa 6-8ml môi trường để nuôi cấy 37oC qua đêm. Sự tăng trưởng tế bào và mật độ tế bào được quan sát dưới kính hiển vi vào ngày hôm sau.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 70% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện. Tế bào này là tế bào treo và tế bào dán tường nhẹ, có thể tham khảo các phương pháp sau:

1, Thu thập: Các tế bào lơ lửng trong chai nuôi cấy được thu thập vào ống ly tâm. Rửa sạch tế bào 1-2 lần bằng PBS không chứa các ion canxi và magiê. Vì các tế bào không được bảo vệ tốt, PBS cũng được tái chế vào ống ly tâm.

2, thêm 0,25% (w/v) 0,53 mM EDTA trong chai nuôi cấy (T25 chai 1-2mL, T75 chai 2-3mL) đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa một cách thích hợp), sau đó quan sát sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu phần lớn tế bào trở nên tròn và rơi ra nhanh chóng lấy lại bàn điều khiển, sau khi nhấn vài lần chai nuôi cấy thêm 3-4ml với 10% FBS môi trường để chấm dứt tiêu hóa.

3, thu thập các tế bào đình chỉ, các tế bào trong chất tẩy rửa pbs và tiêu hóa các tế bào dán tường để ly tâm 1000rpml trong 5 phút, loại bỏ và làm sạch, bổ sung 1-2mL nuôi cấy sau khi treo lại sau khi treo lại để phân chia huyền phù tế bào theo tỷ lệ 1: 2 vào chai T25 mới, thêm 6-8ml theo yêu cầu của hướng dẫn cấu hình môi trường mới để duy trì sức sống tăng trưởng của tế bào, tiếp theo truyền theo theo tình hình thực tế theo tỷ lệ 1: 2~1: 5.

3) Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo. Dưới đây là ví dụ về chai T25:

1, tế bào đông lạnh theo quá trình di truyền tế bào để thu thập các tế bào tiêu hóa tốt vào ống ly tâm, có thể sử dụng bảng đếm máu để xác định mật độ đông lạnh của tế bào. Mật độ đông lạnh được khuyến cáo cho các tế bào nói chung là 1 × 10 ⁶~1 × 10 ⁷tế bào sống/ml.

2, 1000rpm ly tâm 3-5min, loại bỏ Shangqing. Sử dụng dung dịch đông lạnh tế bào được điều chế để treo lại tế bào, mỗi 1 ml dung dịch đông lạnh chứa 1 × 10 ⁶~1 × 10 ⁷tế bào sống/ml được phân phối vào một ống đông lạnh phân phối tế bào vào ống đông lạnh, đánh dấu tên, đại số, ngày tháng và các thông tin khác.

Đặt các tế bào đông lạnh trong hộp làm mát chương trình, -80 độ trong tủ lạnh qua đêm, sau đó chuyển vào thùng chứa nitơ lỏng để lưu trữ. Đồng thời ghi lại vị trí của các ống lưu trữ đông lạnh trong các ống ni - tơ lỏng để tra cứu và sử dụng sau này.

Các bước hoạt động:

Bước 1: Lấy chất đông lạnh không có thủ tục huyết thanh ra khỏi tủ lạnh và chờ sử dụng

Bước 2: Thu thập ly tâm các tế bào của giai đoạn sinh trưởng logarit (các tế bào dán tường tiêu hóa ly tâm, các tế bào lơ lửng ly tâm trực tiếp, tốc độ 1200rpm hoặc 250g, thời gian 3 phút)

Bước 3: Bỏ sạch, thêm một lượng vừa phải chất đông lạnh không lập trình huyết thanh, treo lại tế bào

Bước 4: Đóng gói vào ống lưu trữ đông theo lượng 1~1,5mL/ống, thắt chặt nắp ống và đánh dấu tốt

Bước 5: Di chuyển ống đông trực tiếp vào tủ lạnh -80 ℃, sau 24h chuyển sang nitơ lỏng để bảo quản lâu dài

Bạn có thể chọn giảm nhiệt độ bằng tay khi không có hộp đông lạnh hoặc dịch đông lạnh phi trình tự. Nhưng làm mát gradient thủ công không áp dụng cho tất cả các tế bào, và hiệu quả không ổn định, và cũng cần phải làm xét nghiệm đông lạnh trước.

Chú ý:

1, sau khi nhận được tế bào, nếu bạn thấy rằng đá khô đã bay hơi sạch sẽ, nắp chai lưu trữ đông rơi ra, vỡ và ô nhiễm tế bào, vui lòng liên hệ với chúng tôi ngay lập tức.

2. Tế bào nhận được trước tiên không mở nắp chai, sau khi lau cồn trên thân chai đặt trong hộp nuôi cấy 2 - 4 giờ (tùy thuộc vào mật độ tế bào) ổn định trạng thái tế bào. Sau đó quan sát sự phát triển của tế bào dưới kính hiển vi đảo ngược và chụp ảnh các tế bào theo bội số khác nhau (đề nghị chụp một bức ảnh về bề ngoài tổng thể khi thu tế bào, quan sát màu sắc của môi trường nuôi cấy và tình trạng rò rỉ, sau đó chụp trạng thái tế bào dưới kính hiển vi, 100 *, 200 *), quan sát xem liệu các tế bào có bị ô nhiễm trong quá trình vận chuyển hay không. Làm căn cứ tiêu thụ của chúng tôi.

Vì trạng thái tế bào bị ảnh hưởng bởi môi trường, hoạt động và vận chuyển và các yếu tố khác, công ty chỉ đảm bảo trạng thái tế bào trong vòng một tuần sau khi khách hàng nhận được tế bào, do đó, khách hàng cần phải xuất trình bằng chứng thời gian nhận được tế bào sau khi bán hàng và bằng chứng thời gian khách hàng cung cấp thời gian nhận hàng và thông tin liên lạc của khách hàng sau khi phát hiện ra vấn đề, khoảng thời gian giữa các khoảng thời gian không thể lớn hơn 7 ngày.

4, tất cả các tế bào động vật được coi là có khả năng gây hại sinh học, phải được vận hành trong bảng an toàn sinh học thứ cấp, và chú ý bảo vệ, tất cả các chất thải và đồ dùng tiếp xúc với tế bào này cần được khử trùng sau khi có thể được loại bỏ.
Sản phẩm công ty đang bán:

Nguyên bào sợi cơ xương chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào tiền chất olidodendril thần kinh chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào tiền chất olidodendril thần kinh ở chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào gốc tạo máu tủy xương chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào sụn khí quản ở chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Nguyên bào sợi nướu ở chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào lympho máu ngoại biên của chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào cơ trơn mạc ruột chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Các tế bào cơ trơn mạch máu động mạch cảnh chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào núm vú thật của chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào gốc trung mô phôi phôi chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Chuột Purkeno CellChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào gốc thần kinh tủy sống chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào gốc phôi chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào thần kinh sinh ba chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Microvascular Pericytes của võng mạc chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào gốc nội nha chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào nhân riêng lẻ của tủy xương chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Nguyên bào sợi màng trắng dương vật chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào thần kinh sinh ba chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào khứu giác chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Nguyên bào sợi âm đạo ở chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào sụn hông ở chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

293 HEK-293 (tế bào thận phôi người) Tế bào cơ ruột của chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Chuột Purkeno CellChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Nguyên bào sợi sclera của chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25

Tế bào gốc phôi chuộtChai nuôi cấy 5 × 10 ⁵ Cells/T25