22RV1 (tế bào ung thư tuyến tiền liệt ở người)

22RV1 (tế bào ung thư tuyến tiền liệt ở người)

Tên khác 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; Sản phẩm CWR22R

Loài Con người

Tuổi (Giới tính) ViệtNgười lớn

Nguồn tổ chức tuyến tiền liệt

Đặc tính tăng trưởng tế bào dán tường

Hình thái tế bào Giống tế bào biểu mô

Mô tả nền 22RV1 là một dòng tế bào biểu mô ung thư tuyến tiền liệt ở người từ xenoblant (di truyền liên tục ở những con chuột bị thiến gây suy giảm ung thư tuyến tiền liệt và tái phát sau khi ghép hormone nam CWR22 đáng tin cậy của cha mình); Dòng tế bào 22RV1 biểu hiện kháng nguyên đặc hiệu tuyến tiền liệt. Dihydroxytestosterone kích thích nhẹ sự phát triển của tế bào 22RV1, với các sản phẩm hòa tan được thử nghiệm bởi Western Blot để đáp ứng miễn dịch với kháng thể thụ thể hormone chống androgen; EGF kích thích tăng trưởng tế bào 22RV1, nhưng TGF beta-1 không ức chế tăng trưởng tế bào; 22RV1 có thể phát triển khối u ở chuột trần.

Lớp an toàn sinh học 2

Môi trường tăng trưởng RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P / S

Tỷ lệ thế hệ được đề xuất 1:3-1:4

Tần số thay đổi chất lỏng được đề nghị 2~3 lần/tuần

Thời gian nhân ~40 giờ

Điều kiện lưu trữ đông lạnh

Dung dịch đông lạnh:55% nền tảng+40% FBS+5% DMSO

Nhiệt độ: Nitơ lỏng

Điều kiện nuôi dưỡng

Pha khí: Không khí,95%； CO2, 5%

Nhiệt độ:37℃

Gây khối u Có, hình thành khối u ở chuột khỏa thân.

Biểu hiện receptor thụ thể androgen

Lưu ý DMSO loại bỏ ly tâm là cần thiết khi hồi sức tế bào 22RV1. Giai đoạn đầu của quá trình hồi sinh tế bào đông lạnh, lượng dán tường nhỏ, các cụm dán tường lỏng lẻo, nhưng cuối cùng các tế bào sẽ phẳng và khuếch tán thành một lớp duy nhất rất tốt, quá trình này cần 4-5 ngày. Các tế bào phát triển chậm và các tế bào chỉ có thể phát triển đến 90% sự hội tụ. Tỷ lệ sống lại sau khi đông lạnh tế bào không cao, tỷ lệ đông lạnh được khuyến cáo là 90% huyết thanh+10% DMSO, sử dụng huyết thanh chất lượng cao.

Chú ý:

1, sau khi nhận được tế bào, nếu bạn thấy rằng đá khô đã bay hơi sạch sẽ, nắp chai lưu trữ đông rơi ra, vỡ và ô nhiễm tế bào, vui lòng liên hệ với chúng tôi ngay lập tức.

2. Tế bào nhận được trước tiên không mở nắp chai, sau khi lau cồn trên thân chai đặt trong hộp nuôi cấy 2 - 4 giờ (tùy thuộc vào mật độ tế bào) ổn định trạng thái tế bào. Sau đó quan sát sự phát triển của tế bào dưới kính hiển vi đảo ngược và chụp ảnh các tế bào theo bội số khác nhau (đề nghị chụp một bức ảnh về bề ngoài tổng thể khi thu tế bào, quan sát màu sắc của môi trường nuôi cấy và tình trạng rò rỉ, sau đó chụp trạng thái tế bào dưới kính hiển vi, 100 *, 200 *), quan sát xem liệu các tế bào có bị ô nhiễm trong quá trình vận chuyển hay không. Làm căn cứ tiêu thụ của chúng tôi.

Vì trạng thái tế bào bị ảnh hưởng bởi môi trường, hoạt động và vận chuyển và các yếu tố khác, công ty chỉ đảm bảo trạng thái tế bào trong vòng một tuần sau khi khách hàng nhận được tế bào, do đó, khách hàng cần phải xuất trình bằng chứng thời gian nhận được tế bào sau khi bán hàng và bằng chứng thời gian khách hàng cung cấp thời gian nhận hàng và thông tin liên lạc của khách hàng sau khi phát hiện ra vấn đề, khoảng thời gian giữa các khoảng thời gian không thể lớn hơn 7 ngày.

4, tất cả các tế bào động vật được coi là có khả năng gây hại sinh học, phải được vận hành trong bảng an toàn sinh học thứ cấp, và chú ý bảo vệ, tất cả các chất thải và đồ dùng tiếp xúc với tế bào này cần được khử trùng sau khi có thể được loại bỏ.

Xử lý tế bào:

1) Sự hồi sinh của các tế bào đông lạnh: Các ống chứa 1 mL đình chỉ tế bào được lắc nhanh chóng và tan băng trong bồn nước 37 ℃, thêm vào các ống ly tâm với môi trường 4-6 mL để trộn đều. Ly tâm 3-5 phút trong điều kiện 1000RPM, loại bỏ chất lỏng thượng lưu, tế bào treo lại trên môi trường. Đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào một chai (hoặc đĩa) có chứa 6-8ml môi trường để nuôi cấy 37oC qua đêm. Sự tăng trưởng tế bào và mật độ tế bào được quan sát dưới kính hiển vi vào ngày hôm sau.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 70% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện. Tế bào này là tế bào treo và tế bào dán tường nhẹ, có thể tham khảo các phương pháp sau:

1, Thu thập: Các tế bào lơ lửng trong chai nuôi cấy được thu thập vào ống ly tâm. Rửa sạch tế bào 1-2 lần bằng PBS không chứa các ion canxi và magiê. Vì các tế bào không được bảo vệ tốt, PBS cũng được tái chế vào ống ly tâm.

2, thêm 0,25% (w/v) 0,53 mM EDTA trong chai nuôi cấy (T25 chai 1-2mL, T75 chai 2-3mL) đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa một cách thích hợp), sau đó quan sát sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu phần lớn tế bào trở nên tròn và rơi ra nhanh chóng lấy lại bàn điều khiển, sau khi nhấn vài lần chai nuôi cấy thêm 3-4ml với 10% FBS môi trường để chấm dứt tiêu hóa.

3, thu thập các tế bào đình chỉ, các tế bào trong chất tẩy rửa pbs và tiêu hóa các tế bào dán tường để ly tâm 1000rpml trong 5 phút, loại bỏ và làm sạch, bổ sung 1-2mL nuôi cấy sau khi treo lại sau khi treo lại để phân chia huyền phù tế bào theo tỷ lệ 1: 2 vào chai T25 mới, thêm 6-8ml theo yêu cầu của hướng dẫn cấu hình môi trường mới để duy trì sức sống tăng trưởng của tế bào, tiếp theo truyền theo theo tình hình thực tế theo tỷ lệ 1: 2~1: 5.

3) Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo. Dưới đây là ví dụ về chai T25:

1, tế bào đông lạnh theo quá trình di truyền tế bào để thu thập các tế bào tiêu hóa tốt vào ống ly tâm, có thể sử dụng bảng đếm máu để xác định mật độ đông lạnh của tế bào. Mật độ đông lạnh được khuyến cáo cho các tế bào nói chung là 1 × 10 ⁶~1 × 10 ⁷tế bào sống/ml.

2, 1000rpm ly tâm 3-5min, loại bỏ Shangqing. Sử dụng dung dịch đông lạnh tế bào được điều chế để treo lại tế bào, mỗi 1 ml dung dịch đông lạnh chứa 1 × 10 ⁶~1 × 10 ⁷tế bào sống/ml được phân phối vào một ống đông lạnh phân phối tế bào vào ống đông lạnh, đánh dấu tên, đại số, ngày tháng và các thông tin khác.

Đặt các tế bào đông lạnh trong hộp làm mát chương trình, -80 độ trong tủ lạnh qua đêm, sau đó chuyển vào thùng chứa nitơ lỏng để lưu trữ. Đồng thời ghi lại vị trí của các ống lưu trữ đông lạnh trong các ống ni - tơ lỏng để tra cứu và sử dụng sau này.

Các bước hoạt động:

Bước 1: Lấy chất đông lạnh không có thủ tục huyết thanh ra khỏi tủ lạnh và chờ sử dụng

Bước 2: Thu thập ly tâm các tế bào của giai đoạn sinh trưởng logarit (các tế bào dán tường tiêu hóa ly tâm, các tế bào lơ lửng ly tâm trực tiếp, tốc độ 1200rpm hoặc 250g, thời gian 3 phút)

Bước 3: Bỏ sạch, thêm một lượng vừa phải chất đông lạnh không lập trình huyết thanh, treo lại tế bào

Bước 4: Đóng gói vào ống lưu trữ đông theo lượng 1~1,5mL/ống, thắt chặt nắp ống và đánh dấu tốt

Bước 5: Di chuyển ống đông trực tiếp vào tủ lạnh -80 ℃, sau 24h chuyển sang nitơ lỏng để bảo quản lâu dài

Bạn có thể chọn giảm nhiệt độ bằng tay khi không có hộp đông lạnh hoặc dịch đông lạnh phi trình tự. Nhưng làm mát gradient thủ công không áp dụng cho tất cả các tế bào, và hiệu quả không ổn định, và cũng cần phải làm xét nghiệm đông lạnh trước.

Sản phẩm công ty đang bán:

CCRF-CEM (Bệnh bạch cầu lymphocytic cấp tính của con người T lymphocytic)

A9 (tế bào mô liên kết dưới da của chuột)

AAV-293 (tế bào thận phôi người)

Acc-2 (tế bào ung thư nang tuyến nước bọt của con người)

ACHN (tế bào ung thư tuyến tế bào thận người)

AGS (tế bào ung thư tuyến dạ dày người)

Ana-1 (đại thực bào chuột)

Anglne (tế bào ung thư buồng trứng người)

AR42J (tế bào ngoại tiết tuyến tụy chuột)

ARPE-19 (tế bào biểu mô võng mạc người)

AsPC-1 (tế bào ung thư tuyến tụy di căn ở người)

AtT-20 (tế bào khối u tuyến yên ở chuột)

B16 (tế bào khối u ác tính chuột)

Bcap-37 (tế bào ung thư vú ở người)

BEL-7402 (Tế bào ung thư gan người)

Yếu tố ba thùy ruột lợn(ITF) Bộ xét nghiệm ELISA

Lymphotoxics ở ngườiBộ xét nghiệm Su-beta (LTB)

Lợn trắngBộ xét nghiệm su3 (IL-3)

Hamster Ma trận Metal ProteinBộ dụng cụ Mei9/Gelatin MeiB (MMP-9/Gelatinase B) ELISA

Virus tai xanh ở lợnBộ dụng cụ RT-PCR

Virus mống mắt cá tầm trắngBộ dụng cụ PCR

Virus Bào CầuBộ xét nghiệm PCR

Actinobacteria Nội soiBộ xét nghiệm PCR

Vi khuẩn Staphylococcus ArletteBộ dụng cụ PCR

Histoplasma phổ quátBộ dụng cụ PCR

Thực vật biến đổi genBộ xét nghiệm gen PAT PCR

22RV1 (tế bào ung thư tuyến tiền liệt ở người)Vi khuẩn Staphylococcus ArletteBộ dụng cụ PCR

1 (Bộ dụng cụ PCR RT-1 cho virus Herpes Glample Loại 1)

Trang chủBộ dụng cụ PCR

Virus sốt lợn châu PhiBộ xét nghiệm PCR