Cell Counting Kit-8 Bộ xét nghiệm tăng sinh tế bào

Bộ dụng cụ tăng sinh tế bào Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

Mã sản phẩm: C6005M

Thông số kỹ thuật sản phẩm: 500T

Điều kiện bảo quản:4℃Bảo quản tránh ánh sáng, bảo quản lâu dài-20℃，Ngày hết hạn Xem bao bì bên ngoài。

Giới thiệu sản phẩm:

Bộ đếm tế bào-8Viết tắtCCK8(hoặcSản phẩm WST-8Bộ dụng cụ dựa trênSản phẩm WST-8(Tên hóa học:2-(2-Name-4-Name)-3-(4-Name)-5-(2,4-Name-2H-Muối natri tetrazole mononatri) được sử dụng rộng rãi trong các bộ xét nghiệm độ nhạy cao nhanh chóng để tăng sinh tế bào và độc tính tế bào.

Sản phẩm WST-8+Lĩnh vực thức ăn chăn nuôi: Nguyên liệu bổ sung thực phẩm vi chất trong chăn nuôi (formazan）。 Độ sâu của màu sắc tỷ lệ thuận với sự gia tăng của tế bào và tỷ lệ nghịch với độc tính tế bào. Sử dụng máy đánh dấu enzyme trong450 nmXác định bước sóngODGiá trị, gián tiếp phản ánh số lượng tế bào sống.

Sản phẩm WST-8VângMTTMột sản phẩm thay thế nâng cấp vàMTThoặc khácMTTCác sản phẩm tương tự nhưXTT、MTSSo sánh với nhau có ưu điểm rõ ràng. Trước hết,MTTMenerpene được tạo ra bằng cách khử một số enzyme dehydrogenase trong ty thể không hòa tan trong nước và cần một chất lỏng hòa tan cụ thể để hòa tan; VàSản phẩm WST-8、XTTVàMTSMethanium được tạo ra đều hòa tan trong nước và có thể loại bỏ các bước hòa tan tiếp theo. Thứ hai,Sản phẩm WST-8 Tỷ lệ sinhXTTVàMTSMephrene được tạo ra dễ tan hơn. Một lần nữa,Sản phẩm WST-8hơnXTTVàMTSỔn định hơn, làm cho kết quả thí nghiệm ổn định hơn. ngoài raSản phẩm WST-8VớiMTT、XTTSo với phạm vi tuyến tính rộng hơn, độ nhạy cao hơn.

CCKPhương pháp này được sử dụng rộng rãi trong sàng lọc thuốc, xác định tăng sinh tế bào, xác định độc tính tế bào, thử nghiệm nhạy cảm với thuốc khối u và phát hiện hoạt động của các yếu tố sinh học.

Phương pháp sử dụng:

1. Kiểm tra hoạt động tế bào

（1) Trong96 mạc đường ruột muqueuses digestives (100 μL/lỗ), đề nghị có thể được thiết lập8 Gradient nồng độ tế bào, mỗi cài đặt nồng độ6 Lặp đi lặp lại, ví dụ, theo số lượng tế bào0 / 312,5 / 625 / 1250 / 2500 / 5000 / 10000 / 20000 tế bào / 96Tấm lỗ tiến hành lát sàn. Chiều dày mối hàn góc (37℃,5% CO2）。

（2) Thêm vào mỗi lỗ10 μL CCKGiải pháp (cẩn thận không tạo bong bóng trong lỗ, chúng có thể ảnh hưởng đếnODGiá trị ( Lưu ý: Nếu sản phẩm có thể37℃Xử lý tắm nước, không ảnh hưởng đến việc sử dụng.

（3) ủ các tấm nuôi cấy trong hộp nuôi cấy0,5 - 4 giờLưu ý: Thí nghiệm đầu tiên có thể được thực hiện trong0.5、1、2 Và4 giờSau đó lần lượt dùng máy đo lường enzym, sau đó chọn một điểm thời gian có phạm vi hút quang tương đối thích hợp để thực nghiệm tiếp theo.

（4) Xác định bằng máy đo enzyme450 nmVà600 nm(Loại bỏ nhiễu đáy lỗ) Độ hấp thụ ánh sáng. （5Nếu tạm thời không xác địnhODGiá trị có thể được thêm vào mỗi lỗ10 μL 0,1 McủaHClGiải pháp hoặc1% w / v SDSGiải pháp, và bảo quản tấm nuôi cấy tránh ánh sáng trong điều kiện nhiệt độ phòng.24 giờXác định bên trong, độ hấp thụ sẽ không thay đổi.

2. Tăng sinh tế bào - phát hiện độc tính

（1) Trong96 Tiêm chủng trong tấm lỗ100 μLĐình chỉ tế bào, đề nghị có thể thiết lập8 Gradient nồng độ tế bào, mỗi cài đặt nồng độ6 Lặp đi lặp lại, ví dụ, theo số lượng tế bào0 / 312,5 / 625 / 1250 / 2500 / 5000 / 10000 / 20000 tế bào / 96Tấm lỗ tiến hành lát sàn. Chiều dày mối hàn góc (37℃, 5%CO2）

（2) Thêm vào bảng nuôi cấy1 - 10 μLThuốc kích thích đặc biệt.

（3(ấp trong lồng nuôi cấy một thời gian (ví dụ:6、12、24 hoặc48 giờ）。

（4) Thêm vào mỗi lỗ10 μL CCKGiải pháp (cẩn thận không tạo bong bóng trong lỗ, chúng có thể ảnh hưởng đếnODGiá trị ( Lưu ý: Nếu sản phẩm có thể37℃Xử lý tắm nước, không ảnh hưởng đến việc sử dụng.

（5) ủ các tấm nuôi cấy trong hộp nuôi cấy0,5 - 4 giờLưu ý: Thí nghiệm đầu tiên có thể được thực hiện trong0.5、1、2 Và4 giờSau đó lần lượt dùng máy đo lường enzym, sau đó chọn một điểm thời gian có phạm vi hút quang tương đối thích hợp để thực nghiệm tiếp theo.

（6) Xác định bằng máy đo enzyme450 nmVà600 nm(Loại bỏ nhiễu đáy lỗ) Độ hấp thụ ánh sáng.

（7Nếu tạm thời không xác địnhODGiá trị có thể được thêm vào mỗi lỗ10 μL 0,1 McủaHClGiải pháp hoặc1% w / v SDSGiải pháp, và che đậy tấm nuôi cấy tránh ánh sáng trong điều kiện nhiệt độ phòng.24 giờXác định bên trong, độ hấp thụ sẽ không thay đổi.

Lưu ý: Nếu chất được kiểm tra có tính oxy hóa hoặc giảm, nó có thể được thêm vàoCCKThay thế môi trường tươi trước đó (loại bỏ môi trường và rửa tế bào với môi trường hai lần, sau đó thêm môi trường mới), loại bỏ tác dụng của thuốc. Đương nhiên dưới tình huống dược vật ảnh hưởng tương đối nhỏ, có thể không thay đổi cơ sở bồi dưỡng, trực tiếp khấu trừ cơ sở bồi dưỡng sau khi thêm vào dược vật hấp thu chỗ trống là được.

3. Tính toán công thức

Tỷ lệ sống sót của tế bào=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]xTỷ lệ ức chế=[(Ac-As)/(Ac-Ab)]xNhư:Lỗ thí nghiệm(Cơ sở nuôi cấy có chứa tế bào,CCK-8Thuốc đang chờ xét nghiệm.)Độ hấp thụAC:Lỗ kiểm soát(Cơ sở nuôi cấy có chứa tế bào,CCK-8Không có thuốc để kiểm tra.)Độ hấp thụAb:Lỗ trống(Môi trường nuôi cấy không chứa tế bào và thuốc cần kiểm tra,CCK-8)Độ hấp thụ

Lưu ý

1. Trước khi sử dụng, xin vui lòng ly tâm sản phẩm ngay lập tức đến đáy ống, sau đó tiến hành thí nghiệm tiếp theo.

2. Sử dụng96Lỗ tiến hành lát nền tế bào, nếu thời gian bồi dưỡng khá dài, nhất định phải chú ý vấn đề bốc hơi. Đề nghị bỏ đi một vòng xung quanh, thay vào đó là cùng một lượng.PBSNước hoặc dịch bồi dưỡng.

3. Trước khi phát hiện bằng máy đánh dấu enzyme cần đảm bảo không có bong bóng khí trong mỗi lỗ, nếu không sẽ can thiệp vào việc xác định.

4. Sản phẩm này chỉ giới hạn trong nghiên cứu khoa học, không được sử dụng để chẩn đoán hoặc điều trị lâm sàng, không được sử dụng trong thực phẩm hoặc dược phẩm, không được lưu trữ trong nhà ở thông thường.

5. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, hãy mặc quần áo thử nghiệm và vận hành bằng găng tay dùng một lần.